纖維素是植物細(xì)胞壁的主要結(jié)構(gòu)成分，通常與半纖維素、果膠和木質(zhì)素結(jié)合在一起，其結(jié)合方式和程度對(duì)植物源食品的質(zhì)地影響很大。你知道纖維素的微生物怎么分離的嗎?下面學(xué)習(xí)啦小編給你分享分解纖維素的微生物的分離知識(shí)點(diǎn)，歡迎閱讀。

　　分解纖維素的微生物的分離知識(shí)點(diǎn)

　　一、纖維素與纖維素酶

　　1.纖維素的化學(xué)組成

　　含C、H、O三種元素，是一種多糖。纖維素的基本組成單位是葡萄糖，人體內(nèi)沒(méi)有纖維素酶，所以人體不能直接以纖維素為能源物質(zhì)，但土壤中有分解纖維素的微生物，最終把纖維素分解成葡萄糖釋放到無(wú)機(jī)環(huán)境。

　　2.纖維素的分布

　　棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物，此外，木材、作物秸稈等也富含纖維素。纖維素產(chǎn)生于植物的光合作用，地球上的植物每年產(chǎn)生的纖維素超過(guò)70億噸。研究土壤中分解纖維素的微生物將給我們的生活帶來(lái)很大變化。

　　3.纖維素酶的組分

　　纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三種組分。前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。

　　二、纖維素分解菌的篩選

　　1.方法

　　剛果紅染色法，常用的有兩種，一種是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)，另一種是在倒平板時(shí)就加入剛果紅。

　　2.原理

　　(1)含纖維素的培養(yǎng)基中加入的剛果紅，可與纖維素形成紅色復(fù)合物。

　　(2)當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，形成的纖維二糖、

　　葡萄糖不和剛果紅發(fā)生這種反應(yīng)，紅色復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，可通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。

　　三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

　　1.實(shí)驗(yàn)流程

　　土壤取樣→選擇培養(yǎng)(此步可省略)→梯度稀釋→將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上→挑選產(chǎn)生透明圈的菌落。

　　2.土壤取樣

　　采取土樣時(shí)，可以選擇富含纖維素的環(huán)境。

　　3.選擇培養(yǎng)

　　(1)目的：增加纖維素分解菌的濃度，確保能夠從樣品中分離得到所需要的微生物。

　　(2)操作方法：將土樣加入裝有30 mL選擇培養(yǎng)基的錐形瓶中，將錐形瓶固定在搖床上，在一定溫度下振蕩培養(yǎng)1～2_d，直至培養(yǎng)液變混濁，也可重復(fù)選擇培養(yǎng)。

　　4.涉及的生物技術(shù)

　　主要有：培養(yǎng)基的制作、無(wú)菌操作技術(shù)、稀釋涂布平板法、選擇培養(yǎng)基的作用、土壤取樣等。

　　分解纖維素的微生物的分離習(xí)題

　　1.微生物體內(nèi)能夠使纖維素分解成纖維二糖的酶是(A)

　　A.C1酶和Cx酶

　　B.C1酶和葡萄糖苷酶

　　C.Cx酶和葡萄糖苷酶

　　D.C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶

　　解析：纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括三種組分，其中C1酶和Cx酶能將纖維素分解成纖維二糖，而葡萄糖苷酶能將纖維二糖分解成葡萄糖。

　　2.關(guān)于纖維素酶的敘述中，錯(cuò)誤的是(A)

　　A.牛、羊等草食動(dòng)物可以合成纖維素酶，從而利用纖維素

　　B.纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三種組分

　　C.纖維素可被纖維素酶水解成葡萄糖，為微生物提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

　　D.分解纖維素的細(xì)菌、真菌、放線菌，都是通過(guò)產(chǎn)生纖維素酶來(lái)分解纖維素的

　　解析：牛、羊等草食動(dòng)物不能合成纖維素酶，它們之所以能利用纖維素是因?yàn)樗鼈兊牧鑫钢杏性S多微生物可分泌纖維素酶;纖維素被纖維素酶分解后的產(chǎn)物是葡萄糖，葡萄糖可作為微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì);能分解纖維素的微生物都能產(chǎn)生纖維素酶，它們通過(guò)纖維素酶來(lái)分解纖維素。

　　3.要將能分解纖維素的細(xì)菌從土壤中分離出來(lái)，應(yīng)將它們接種在(C)

　　A.加入指示劑的鑒別培養(yǎng)基上

　　B.含有蛋白胨的固體培養(yǎng)基上

　　C.只含纖維素粉而無(wú)其他碳源的選擇培養(yǎng)基上

　　D.含四大營(yíng)養(yǎng)要素的培養(yǎng)基上

　　解析：選擇纖維素分解菌的培養(yǎng)基中應(yīng)含有該種菌生長(zhǎng)發(fā)育所需的營(yíng)養(yǎng)條件，其他菌種在這種培養(yǎng)基中不能生存。

　　4.分離土壤中纖維素分解菌所用到的方法是(B)

　?、傧♂尩蛊桨宸ā、谕坎计桨宸ā、蹎渭?xì)胞挑取法?、苓x擇培養(yǎng)基分離

　　A.①② B.②③④

　　C.②③ D.①③④

　　解析：分離土壤中的纖維素分解菌時(shí)，先進(jìn)行選擇培養(yǎng)，以增大纖維素分解菌的濃度，即富集培養(yǎng)，梯度稀釋后涂布平板、培養(yǎng)，最后運(yùn)用挑取單細(xì)胞法以獲得純培養(yǎng)。

　　5.從土壤中篩選纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)正確的是(B)

　　A.土壤取樣→梯度稀釋→稀釋涂布平板→發(fā)酵培養(yǎng)

　　B.土壤取樣→選擇培養(yǎng)→稀釋涂布平板→挑選菌落

　　C.土壤取樣→梯度稀釋→選擇培養(yǎng)→挑選菌落

　　D.土壤取樣→梯度稀釋→稀釋涂布平板→選擇培養(yǎng)→挑選菌落

　　解析：土壤取樣之后，應(yīng)先經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)，以增大目的菌株的濃度，然后為避免一個(gè)培養(yǎng)基上的菌落太多，需進(jìn)行稀釋涂布平板。

　　6.剛果紅能與哪項(xiàng)物質(zhì)形成紅色復(fù)合物(B)

　　A.纖維二糖　　 B.纖維素

　　C.葡萄糖　　　 D.麥芽糖

　　7.纖維素酶的測(cè)定方法一般是(B)

　　A.對(duì)纖維素進(jìn)行定量測(cè)定

　　B.對(duì)纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定

　　C.對(duì)纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的纖維二糖進(jìn)行定量測(cè)定

　　D.對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行定量測(cè)定

　　解析：進(jìn)行纖維素酶的測(cè)定，測(cè)定方法一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定。

　　8.在分離纖維素分解菌過(guò)程中往往需要震蕩，其作用不包括(D)

　　A.使細(xì)菌能與培養(yǎng)基混合均勻

　　B.使細(xì)菌能充分吸收氧氣

　　C.使細(xì)菌能快速繁殖

　　D.防止細(xì)菌失水

　　解析：纖維素分解菌屬好氧型細(xì)菌，充分震蕩，一方面可促進(jìn)細(xì)菌與培養(yǎng)基混合均勻，有利于其吸收營(yíng)養(yǎng)，另一方面讓細(xì)菌能充分與空氣接觸，有利于吸收氧氣，以上兩方面都能促進(jìn)細(xì)菌快速繁殖。

　　9.在加入剛果紅的培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)如圖所示透明圈，產(chǎn)生的透明圈是(D)

　　A.剛果紅與纖維素形成的復(fù)合物

　　B.剛果紅與纖維二糖形成的復(fù)合物

　　C.纖維素分解后形成的葡萄糖導(dǎo)致的

　　D.以纖維素分解菌為中心形成的

　　解析：剛果紅可以與纖維素結(jié)合形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅—纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。

　　10.下列是關(guān)于“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，其中錯(cuò)誤的是(D)

　　A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板

　　B.取104、105 、106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各0.1 mL，分別涂布于各組平板上

　　C.將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置， 37 ℃恒溫培養(yǎng)24～48 h

　　D.確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)

　　解析：確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求平均值，再通過(guò)計(jì)算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)。