兔耳風(fēng)沖劑學(xué)術(shù)論文(2)
兔耳風(fēng)沖劑學(xué)術(shù)論文
兔耳風(fēng)沖劑學(xué)術(shù)論文篇二
HPLC測(cè)定復(fù)方杏香兔耳風(fēng)顆粒中綠原酸的含量
作者:梁兆昌,楊建平,郭艷萍
【關(guān)鍵詞】 復(fù)方杏香兔耳風(fēng)膠囊;綠原酸;HPLC法;含量測(cè)定
0引言
復(fù)方杏香兔耳風(fēng)顆粒由杏香兔耳風(fēng)、白術(shù)二味中藥組成,用于濕熱下注所致慢性宮頸炎、子宮內(nèi)膜炎、陰道炎、白帶等癥. 其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第14冊(cè),該標(biāo)準(zhǔn)未收載含量測(cè)定項(xiàng)目,為了控制其質(zhì)量,我們 參考 文獻(xiàn)[1]用HPLC法測(cè)定該制劑中綠原酸的含量.
1儀器和試藥
日本島津LC?10ATvp液相色譜儀,N2000色譜數(shù)據(jù)工作站;綠原酸對(duì)照品( 中國(guó)藥品生物制品檢定所提供,批號(hào)110753?200326),甲醇(色譜純),其他試劑均為分析純.
2方法和結(jié)果
2.1色譜條件DiamonsilTMC18 ODS色譜柱(5 μm, 200×4.6 mm);流動(dòng)相:甲醇?水?冰醋酸?三乙胺(18∶85∶1∶0.3);檢測(cè)波長(zhǎng):327 nm;流速:1.0 mL/min .
2.2供試溶液的制備
2.2.1對(duì)照品溶液的制備精密稱取綠原酸對(duì)照品2.52 mg,置于50 mL棕色量瓶中,加500 mL/L甲醇并稀釋至刻度,搖勻. 精密量取4 mL置10 mL棕色量瓶中,加500 mL/L甲醇至刻度,搖勻,即得(20.16 mg/L).
2.2.2供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下的本品內(nèi)容物,混勻,研細(xì),取約0.5 g精密稱定,置50 mL棕色瓶中,加500 mL/L甲醇40 mL,超聲處理30 min,放冷,用500 mL/L甲醇稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,即得.
2.2.3缺杏香兔耳風(fēng)陰性供試品溶液的制備取杏香兔耳風(fēng)陰性對(duì)照品0.15 g,照2.2.2項(xiàng)下的方法同法制成缺杏香兔耳風(fēng)陰性對(duì)照品溶液.
2.3系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)精密吸取上述三種溶液與空白溶劑各20 μL注入液相色譜儀測(cè)定,記錄色譜圖,結(jié)果見(jiàn)圖1. 可見(jiàn)供試品溶液主峰保留時(shí)間與缺杏香兔耳風(fēng)陰性對(duì)照品保留時(shí)間一致,陰性對(duì)照溶液在此時(shí)無(wú)吸收峰. 即本試驗(yàn)條件下綠原酸與其他組分完全分離,其他組分對(duì)測(cè)定無(wú)干擾.
2.4線性關(guān)系考察分別精密量取綠原酸對(duì)照品溶液(50.40 mg/L)1.0,2.0,4.0,6.0,8.0 mL置于10 mL容量瓶中,用500 mL/L甲醇稀釋至刻度,搖勻. 即得5.04, 10.08, 20.16, 30.24, 40.32 mg/L的綠原酸對(duì)照品溶液. 分別精密吸取20 μL,依次注入液相色譜儀測(cè)定,結(jié)果以濃度(mg/L)對(duì)峰面積進(jìn)行線性回歸,得回歸方程:Y=26536 X-11023, r=0.9997. 結(jié)果表明綠原酸在5.04~50.40 μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系.
A:對(duì)照品溶液;B: 樣品溶液;C:陰性對(duì)照液.
圖1綠原酸HPLC色譜圖(略)
2.5精密度試驗(yàn)精密吸取對(duì)照品溶液20 μL,重復(fù)進(jìn)樣5次,測(cè)定結(jié)果RSD=1.18%. 可見(jiàn)本方法具有較高的精密度,所選定的色譜條件系統(tǒng)穩(wěn)定. 2.6重現(xiàn)性試驗(yàn)取同一批號(hào)復(fù)方杏香兔耳風(fēng)顆粒樣品5份,按2.2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液,分別依法測(cè)定. 結(jié)果,綠原酸含量RSD=1.48%. 表明本方法重現(xiàn)性好.
2.7穩(wěn)定性試驗(yàn)按照含量測(cè)定條件,對(duì)同一批樣品(20060108)在0,2,4,8,12,24,48 h,分別進(jìn)樣20 μL,測(cè)定綠原酸峰面積, 計(jì)算綠原酸含量,RSD=2.08%. 說(shuō)明樣品穩(wěn)定性好.
2.8回收率試驗(yàn)精密稱取已知含量的樣品(批號(hào)20060108,含量1.60 mg/g)6份,分別精密加入綠原酸對(duì)照品500 mL/L甲醇溶液(87.6 mg/L)適量,照綠原酸含量測(cè)定方法測(cè)定其含量,計(jì)算回收率,結(jié)果見(jiàn)表1.
2.9樣品含量測(cè)定按上述綠原酸含量測(cè)定方法對(duì)3批樣品(20060107,20060106,20060109),綠原酸含量分別為0.38,0.26,0.45 mg/g.
2.10不同批次杏香兔耳風(fēng)藥材中綠原酸含量測(cè)定 參考 文獻(xiàn)[1-2]測(cè)定不同批次杏香兔耳風(fēng)藥材中綠原酸的含量. 結(jié)果為0.85,0.21,0.42,0.63,1.34,0.26. 不同批次杏香兔耳風(fēng)藥材的含量測(cè)定結(jié)果顯示,杏香兔耳風(fēng)藥材中綠原的含量差異較大,為0.21%~1.34%. 提示投料前應(yīng)對(duì)杏香兔耳風(fēng)藥材的綠原酸含量進(jìn)行控制.
表1綠原酸回收率試驗(yàn)結(jié)果(略)
3討論
用紫外分光光度法分析比較綠原酸對(duì)照品及樣品溶液在200~400nm波長(zhǎng)間的紫外吸收光譜,結(jié)果表明在本實(shí)驗(yàn)條件,綠原酸在327nm波長(zhǎng)處有最大的吸收峰,故選擇327nm為檢測(cè)波長(zhǎng). 我們?cè)疾炝瞬煌V柱及不同甲醇含量(10%~50%)下,綠原酸與雜質(zhì)間的分離度. 結(jié)果表明,選擇DiamonsilTMC18 ODS色譜柱(5 μm, 200×4.6 mm),綠原酸與雜質(zhì)可達(dá)到完全基線分離. 同時(shí)甲醇比例的減少,綠原酸與雜質(zhì)分離度逐漸增大,但分離時(shí)間也相應(yīng)延長(zhǎng). 當(dāng)甲醇含量為18%時(shí)即可達(dá)完全分離,為保證方法的耐用性,將甲醇?水調(diào)整為18∶85. 我們采用HPLC法測(cè)定綠原酸含量,操作準(zhǔn)確簡(jiǎn)便、靈敏度高、重現(xiàn)性好,有利于該品種質(zhì)量的控制,確保藥物的臨床療效.
【參考文獻(xiàn)】
[1] 國(guó)家藥典委員會(huì). 中國(guó)藥典一部[M]. 北京:化學(xué) 工業(yè)出版社,2005:152-153.
[2] 王靜,常新全,劉俐純,等. HPLC法測(cè)定感冒止咳顆粒劑中綠原酸和綠原酸的含量[J]. 中成藥,2004,26(3):206.
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