酶標儀的用法
酶標儀，即酶聯(lián)免疫檢測儀，是酶聯(lián)免疫吸附試驗的專用儀器。實際上就是一臺變相的專用光電比色計或分光光度計，其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同。下面學(xué)習(xí)啦小編就給大家介紹酶標儀的用法。
酶標儀的簡介
酶標儀，即酶聯(lián)免疫檢測儀，是酶聯(lián)免疫吸附試驗的專用儀器。實際上就是一臺變相的專用光電比色計或分光光度計，其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同。可簡單地分為半自動和全自動2大類，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一個比色計,即用比色法來分析抗原或抗體的含量。 ELISA測定一般要求測試液的最終體積在250μL以下，用一般光電比色計無法完成測試，因此對酶標儀中的光電比色計有特殊要求。
酶標儀9602是由北京普朗研發(fā)生產(chǎn)，儀器測量準確，重復(fù)性好，能做定性和定量兩種檢測，具有質(zhì)控功能;強大的數(shù)據(jù)處理功能，無需外接計算機即可做126個項目，自動完成準確的定量分析。
酶標儀的使用方法
開機
1將酶標儀后部的電源開關(guān)燈打開，儀器將顯示自檢、基礎(chǔ)酶聯(lián)、軟件版本號，隨后顯示基礎(chǔ)酶聯(lián)、準備和時間。在自檢過程中，儀器對每一個已裝的濾光片選擇合適的光強度，開機后，等候1分鐘預(yù)熱。
2開機后，測量模式1及其某些參數(shù)(如：單波長檢測、1號濾光片、不作數(shù)據(jù)計算，進板方式、無板統(tǒng)計分析和打印機方式)都已默認。
裝紙
1按下paperfeed健，取下運輸中裝入打印機系統(tǒng)的紙張，將卷紙游離端插入儀器后部的插口，直至有輕微阻力感。注意卷紙轉(zhuǎn)動的正確方向。
2按下paperfeed健，直至將紙送入打印機。將卷軸插入卷紙，將卷軸及卷紙放入儀器后部的凹槽。
檢測
選擇程序模式時，先按shirt鍵，再按enter鍵。程序模式有：基礎(chǔ)酶聯(lián)軟件、凝集檢測軟件、臨界值定性軟件、曲線回歸定量軟件。在確定程序模式后，進入自檢并完成。在每個程序模式里選擇所需的測量模式和參數(shù)、計算模式和參數(shù)。按star健開始檢測。檢測后，結(jié)果會輸出至內(nèi)置打印機或通過接口輸出。
酶標儀的原理
酶標儀實際上就是一臺變相的專用光電比色計或分光光度計，其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同.圖示是一種單通道自動進樣的酶標儀工作原理圖.光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光，進入塑料微孔極中的待測標本.該單色光一部分被標本吸收，另一部分則透過標本照射到光電檢測器上，光電檢測器將這一待測標本不同而強弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號.電信號經(jīng)前置放大，對數(shù)放大，模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進行數(shù)據(jù)處理和計算，最后由顯示器和打印機顯示結(jié)果.微處理機還通過控制電路控制機械驅(qū)動機構(gòu)X方向和Y方向的運動來移動微孔板，從而實現(xiàn)自動進樣檢測過程.而另一些酶標儀則是采用手工移動微孔板進行檢測，因此省去了X,Y方向的機械驅(qū)動機構(gòu)和控制電路，從而使儀器更小巧，結(jié)構(gòu)也更簡單.
微孔板是一種經(jīng)事先包理專用于放置待測樣本的透明塑料板，板上有多排大小均勻一致的小孔，孔內(nèi)都包埋著相應(yīng)的抗原或抗體，微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液.
光是電磁波，波長100nm～400nm稱為紫外光，400nm～780nm之間的光可被人眼觀察到，大于780nm稱為紅外光。人們只所以能夠看到色彩，是因為光照射到物體上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色，是因為植物吸收的大部分為紅橙光和藍紫光，但對綠色不吸收，反射出來，所以植物呈現(xiàn)為綠色。酶標儀測定的原理是在特定波長下，檢測被測物的吸光值。
檢測單位
光通過被檢測物，前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量，特定波長下，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
檢測單位用OD值表示，OD是opticaldensity(光密度)的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度，OD=1og(1/trans)，其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則，OD值與光強度成下述關(guān)系：
E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度，Ι0為在檢測物之前的光強度，Ι為從被檢測物出來的光強度。
OD值由下述公式計算：
E=OD=C×D×E
C為檢測物的濃度D為檢測物的厚度E為摩爾因子
在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長，在此波長下，此物質(zhì)能夠吸收最多的光能量。如果選擇其它的波長段，就會造成檢測結(jié)果的不準確。因此，在測定檢測物時，我們選擇特定的波長進行檢測，稱為測量波
長。
但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收，為了消除這種非特異性吸收，我們再選取一個參照波長，以消除這個不準確性。在參照波長下，檢測物光的吸收最小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。
檢測值計算
儀器中的檢測器接收透過被檢測物的光能量，轉(zhuǎn)換成二進位數(shù)字信號，最大為4095。儀器定義沒有光源下的透光值為0%，沒有檢測物的透光值為100%。則實際檢測中，檢測物的透光值均在0%一100%之間。透光值
的計算如下：
T=(Meas—Min)/(Max—Min)
其中T為透光值，Meas為檢測的二進位數(shù)值，Min為在0%的情況下檢測的二進位數(shù)值，Max為在100%的情況下檢測的二進位數(shù)值，舉例如下：
MaX=3600Mn=20Meas=30
T=(30-20)/3600-20)=0.0028
OD=1og(1/T)=1og(1/0.0028)=2.552
中心定位
儀器會自動對酶標孔進行中心定位，中心定位是要消除酶標孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測的不準確。在對每一個酶標儀進行檢測時，儀器其實要進行35個點的測量，選取最中間的5個點的均值為本孔的OD值。
光源的參照通道
參照通道是用來校準由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響。
用途和其它提示
用于ELISA試劑的測定，廣泛用于各種實驗室，包括臨床實驗室。
質(zhì)量控制
質(zhì)量控制是試劑檢測的重要因素。請按照試劑說明書的要求進行質(zhì)量控制。
空白校正
有一些試劑盒的說明書將空白孔設(shè)置為空氣，其它大多數(shù)空白孔的設(shè)置是用試劑來設(shè)置的，請按照試劑盒的說明書要求進行。
檢測結(jié)果的解釋
由于有相當多的因素會影響檢測的結(jié)果，如不同的酶標板，檢測試劑的體積，都會造成OD值的不同，因此，只有使用同一酶標板反應(yīng)的試劑檢測結(jié)果才能比較和分析。對結(jié)果的臨床解釋請依照試劑盒的說明書進行.
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