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滋養(yǎng)層和飼養(yǎng)層細胞的關(guān)系

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  飼養(yǎng)層細胞就是指一些特定細胞經(jīng)有絲分裂阻斷劑處理后所得的細胞單層。那么滋養(yǎng)層和飼養(yǎng)層細胞的關(guān)系是什么?下面是學(xué)習(xí)啦小編精心為你整理的滋養(yǎng)層和飼養(yǎng)層細胞的關(guān)系,一起來看看。

  滋養(yǎng)層和飼養(yǎng)層細胞的關(guān)系

  1.滋養(yǎng)層細胞:

  在胚胎發(fā)育成桑椹胚后,桑椹胚進一步發(fā)育,細胞開始出現(xiàn)分化。聚集在胚胎的一端,個體較大的細胞,稱為內(nèi)細胞團(inner cell mass,ICM),將來發(fā)育成胎兒的各種組織,而沿透明帶內(nèi)壁擴展和排列的,個體較小的細胞,稱為滋養(yǎng)層細胞,它們將來發(fā)育成胎膜和胎盤。

  所以做基因診斷時,通常取少量滋養(yǎng)層細胞診斷是否患有遺傳病,這樣不會影響胎兒發(fā)育.

  2.飼養(yǎng)層細胞:

  在正常機體內(nèi),細胞除了獲得一些血液來的營養(yǎng)外,還在細胞與細胞之間互換特殊的物質(zhì),用于分裂分化和營養(yǎng)等。因而,在細胞體外培養(yǎng)中,除了正常的培養(yǎng)基外,先培養(yǎng)一層特殊的細胞,然后再在其上接種要實驗的細胞,這樣更能模擬體內(nèi)環(huán)境。這些特殊的細胞就是飼養(yǎng)層細胞,通常是成纖維類細胞、輸軟管表皮細胞。

  這些細胞可以提供實驗細胞更好的營養(yǎng),有的分化研究則是必須有飼養(yǎng)層細胞。

  滋養(yǎng)層和飼養(yǎng)層細胞的影響因素

  飼養(yǎng)層的影響,主要體現(xiàn)在飼養(yǎng)層種類、絲裂霉素處理滋養(yǎng)層的時間、飼養(yǎng)層細胞的代數(shù)和飼養(yǎng)層細胞的密度等。動物種類不同對飼養(yǎng)層種類的要求也不同。

  飼養(yǎng)層種類

  STO PMEF: 對各種動物都較適宜,,但最可靠的方法還是根據(jù)動物種類篩選最佳飼養(yǎng)層為宜。有研究表明,PMEF比STO更適合用于小鼠ES(胚胎干細胞)的培養(yǎng)。

  UE(子宮上皮細胞)

  BRL(大鼠肝細胞)等

  動物種類

  需要經(jīng)過篩選來確定最適宜該種動物ES分離克隆的飼養(yǎng)層

  絲裂霉素處理滋養(yǎng)層的時間

  目前絲裂霉素(常用有絲分裂阻斷劑)處理時間在小鼠成纖維細胞上一般要求為:在37攝氏度,5%二氧化碳飽和溫度的條件下處理24h,時間過短達不到預(yù)定目的,成纖維細胞不能被成功地抑制住,時間過長則使細胞老化,活性下降,分泌因子的能力降低,從而直接影響ES細胞增殖和分化的抑制。同時處理完的清洗工作也很重要,一般要求用無鈣鎂PBS沖洗4~5遍,以確保絲裂霉素的徹底清除。

  飼養(yǎng)層細胞的代數(shù)及密度

  以小鼠成纖維細胞為例,選3~5代,密度為10^6-10^7個/ml為宜,代數(shù)過低所含雜細胞太多,代數(shù)過高則細胞活力降低。

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